Плр цитомегаловірусу в крові або мазку
Цитомегаловірус або CMV - поширений вірус із сімейства герпесвірусів. Один з ефективних методів його виявлення - полімеразна ланцюгова реакція або ПЛР.
Діагностика вірусу проводиться високоточної технікою, що працює на молекулярно-генетичному рівні. ЦМВ виявляється в хронічній / гострій фазі або латентної стадії (коли захворювання себе ще не проявило). ПЛР іноді є єдиним тестом визначення інфекції, коли інші техніки не працюють.
опис методу
ПЛР відноситься до одних з найточніших методів виявлення CMV-вірусу. Достовірні дані отримують з взятого у пацієнта біологічного матеріалу, в якому виявляється і досліджується геном збудника, т. Е. Ділянка ДНК вірусу. Кількісне і якісне визначення вірусу полягає в багаторазовому подвоєнні (ампліфікації) частини молекули з ДНК за допомогою впливу ферментів з отриманням точної копії відібраного біологічного матеріалу пацієнта.
Здійснюється це в лабораторії на спеціальному реакторі. Реакція розмноження проходить в кілька стадій, тому називається ланцюгової. Отриманий матеріал дозволяє візуально досліджувати пробу, порівняти з еталоном в базі даних, встановити діагноз, на підставі якого проводиться підбір схеми лікування.
Переваги і недоліки методу
ПЛР-діагностика наділена масою плюсів, головні з яких:
- Можливість проведення тесту з великим набором біологічного матеріалу:
- зішкріб з сечовипускального каналу, шийки матки, піхви,
- сеча, слина, спинномозкова рідина.
- Час від забору матеріалу до отримання результатів дослідження не перевищує 2-х діб.
- Висока чутливість методу ПЛР, що дозволяє виявити збудника в відрізку ДНК CMV. Завдяки цій перевазі, хвороба виявляється на ранніх стадіях в латентній або персистуючої формі інфекції.
- Точність методу при дослідженні будь-якої людської рідини і мазків складає 90-95%. Але вірус може бути присутнім в різних тканинах, не тільки в досліджуваних.
- Похибка дослідження не перевищує 3-5%.
Незважаючи на високу ефективність і точність, у методу є недоліки:
- Невисока специфічність і низька прогностична цінність. ПЛР не дозволяє відрізнити латентну фазу життєдіяльності вірусу від активної стадії захворювання.
- Неможливість диференціації первинної інфекції ЦМВ від повторної реактивації хронічної форми.
- Складнощі з оцінкою давності зараження, ступеня патогенності і агресивності, властивої цитомегаловірусу.
- Відсутність можливості прогнозування розвитку хвороби.
- Потреба використання додаткових методів діагностики, наприклад, ІФА (для уточнення даних).
Матеріали для дослідження
При ПЛР-діагностики на ЦМВ досліджуються різні рідини людського тіла, тому може знадобитися здати:
- посів з рота,
- кров,
- сечу,
- мазок з рота (мокроту),
- зішкріб з уретри або піхви,
- спинномозкову рідину,
- грудне молоко.
Підготовка та правила здачі аналізу
Точність і достовірність результатів ПЛР-тесту визначається:
- якістю реактивів,
- ступенем кваліфікації і уважністю співробітників лабораторій,
- дотриманням необхідних правил підготовки пацієнта.
Перед проходженням тестів слід не вживати алкоголь і жирну їжу за 2 дні до процедури.
Основні вимоги при проходженні тестів на ЦМВ методом ПЛР:
- Перед дослідженням, слід припинити прийом антибіотиків і антибактеріальних засобів за 2 дні до передбачуваної здачі біоматеріалу. Скасування інших ліків узгоджується з лікарем.
- Напередодні здачі крові для ПЛР можна курити мінімум 60 хвилин.
- Не вживати алкоголь, не їсти жирної їжі за 2 дні до дослідження.
- Перед здачею біоматеріалу для ПЛР не рекомендується проходити рентгенографію, ректальні огляди, ряд фізіотерапевтичних процедур. Вони можуть вплинути на результат, викликавши зміни в цитомегаловірус.
- Здача крові відбувається в ранкові години і натщесерце. Допускається здача в вечірній час, але після голодування протягом 6 годин.
- Зішкріб з піхви, цервікального каналу здається за таких умов:
- за добу не спринцюватися, не вводити медпрепаратів,
- за 3 доби необхідно уникати статевих контактів,
- при здачі аналізу перед зачаттям зішкріб береться на 5-й день від початку або до 5-го дня до планованого завершення менструації,
- зішкріб з уретри проводиться не раніше 2-х годин з моменту останнього сечовипускання.
- Рідина з сечового міхура збирається вдома (вранці і натщесерце), і здається в лабораторії не пізніше 3-х годин після збору.
- Аналіз слини проводиться наступним чином: перед здачею мазка потрібно не їсти, не чистити зуби. Ці маніпуляції можуть викликати зміни в слині, що призведе до помилкових результатів.
Терміни готовності ПЛР-аналізу
Результат буде готовий протягом 2-х діб з моменту здачі біоматеріалу. Іноді результат готовий в перший день.
інтерпретація результатів
Позитивна відповідь виявляється за наступними даними:
- в зразку біоматеріалу виявили фрагменти ДНК з цитомегаловірусом, що говорить про інфікування вірусом,
- в пробі присутня сечовина, що свідчить про порушення правил здачі біоматеріалу та отриманні ложноположительного відповіді.
Негативна відповідь виявляється за наступними даними:
- в гатунку не виявлено фрагмент ДНК, характерний для цитомегаловірусу,
- в біоматеріалу не присутній достатньої кількості епітеліальних клітин для виявлення вірусу через порушення правил забору проби на аналіз.
Результати можуть видаватися в процентах.
При здачі крові і іншої рідини проводиться визначення рівня антитіл:
- IgM для оцінки первинного зараження вірусом або диференціації загостреної хронічної стадії інфекції, що могло статися за останні 2-4 місяці,
- IgG для виявлення інфекції, але без визначення моменту зараження і активності вірусу.
Якщо у дорослого з хорошою імунною системою в мазку, сечі або соскобе виявлено наявність ЦМВ, специфічне лікування не потрібне.
Отже, присутність антитіл до вірусу і отримання позитивних результатів ПЛР-діагностики або посіву на ЦМВ при відсутності клінічної картини захворювання не є приводом лікувати інфекцію противірусною терапією.
Зміст:- опис методу
- Переваги і недоліки методу
- Матеріали для дослідження
- Підготовка та правила здачі...
- Терміни готовності ПЛР-аналізу
- інтерпретація результатів